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一、概念

1、细胞系(Cell Line)：原代培养舞经首次传代成功即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系(Lineage of Cells)所组成。

2、细胞株(Cell Strain)：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。

细胞株的特殊性质或标志必须在整

个培养期间始终存在。

如果不能继续传代或传代数有限，称为有限细胞株(finitecell strain);如果可以连续传代，称为连续细胞株(continuous cell

strain)。

对于人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。

二、建立细胞系(或株)的要求

什么样的体外培养群可被认可为己鉴定的细胞，视具体情况而定，无统一规定。

对于用作原代培养的细胞只要供体均一，取材部位及组织种类等条件稳定即

可，如用做长期培养，特别是反复传代的细胞，常需做如下说明：

1、组织来源：细胞供体所属物种，来自人体或者动物;

个体性别、年龄;取材的器官或组织。

如系肿瘤组织，应说明临床和病理诊断，以及病历号等。

2、细胞生物学检测：

了解细胞一般和特殊的生物学性状，如细胞一般形态，特异结构，细胞生长曲线和分裂指数，倍增时间，接种率等。

如为肿瘤细胞，为说明来源于原肿瘤组织并保持恶性，须做软琼脂培养，异体接种致瘤和对正常组织侵润力等实验。

3、培养条件和方法;应说明细胞系(或株)适应的生存环境，即指明使用的培养基、血清种类、用量以及适宜PH值。

三、若干细胞建株的要点及基本过程

(一)肿瘤细胞培养技术要点

1、取材：材料主要来源于外科手术或活检瘤组织，取材时避免用坏死组织，要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位，瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养

材料。

取材后尽快培养，因故不能立即培养者，可冻存。

其培养方法及冻存方法同前述正常组织。

2、成纤维细胞排除：在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞，培养时能与瘤细胞同时生长，并常压过癌细胞，导致癌细胞生长受阻以至消失，应仔细排

除。

排除方法常有：机械刮除法、反复贴壁法、消化排除法、胶原酶消化法等。

3、提高肿瘤细胞培养存活率和生长率

根据实验经验，肿瘤细胞在体外不易培养，建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。

一般当肿瘤组成或细胞被原代培养后，要经过对新环境的适应才能生长，因

此不能局限于一般培养法，须采用一些特殊措施。

如：用适宜底物，鼠尾胶原底层及饲细胞底层等。

用细胞生长因子，根据细胞种类不同选用不同的促细胞生

长因子，如胰岛素、氢化可的松，雌激素等。

也可以考虑动物媒介培养。

(二)人类淋巴母细胞建株方法

l、4ml肝素抗凝血于离心管中，加入2ml RPMI 1640。

2、混匀后沿管壁缓慢加到预置有4ml淋巴细胞分离液的液面上静置30min。

3、1500rpm，15min，吸取白细胞层(第二层)于另一离心管中。

4、加RPMI 1640 5ml洗涤白细胞两次。

5、将白细胞接种至1ml RPMI 1640培养基中，加入10μl环胞霉素和100μl的EBV(EB病毒)液，混匀。

6、水浴摇床，40次/分，37℃，3hr。

7、1500rpm，15min。

将细胞接种至1ml培养基中(内含谷氨酰胺1mM/ml)加入10μl环胞霉素，轻轻混匀，37℃培养。

8、5天后观察细胞转化和生长情况，决定是否半量换液。

一般半量换液l—2次，并维持环胞霉素的浓度。

9、待转化细胞数量明显上升，并出现细胞团块后，可转入25ml细胞培养瓶中，加1—2ml培养基，37℃培养10—15天，一般每隔3—4天观察一次，决定是否

换液，传代。

10、细胞生长达一定数量后冻存，冻存前应进行核型分析和存档。

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怎么都说生命科学没前途？ 所谓的不好就业是以为没有这方面的公司吗？如果是进研究机构会不会还好一点？

说实在的，不怎么好,主要是本科生学的东西太少,就业的话还是要考研,如果学的深了,前途无量. 生命科学应该是相当受社会所欢迎的，主要是搞科研，譬如开发新药品、对人体进行新的探索和研究。

有人预言21世纪是生物科学的世纪，谁掌握了生命科学，谁就主宰了一切。

从总体上看，当代生物科学主要朝着微观和宏观两个方面发展：在微观方面，生物学已经从细胞水平进入到分子水平去探索生命的本质；在宏观方面，生态学的发展正在为解决全球性的资源和环境等问题发挥着重要作用。

本科生一般学的不深、没吃透这个专业，在这个领域很难有所建树，最好还是去考研究所。

如果把这门专业吃透了，大有可为。

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看看大牛饶毅是怎么评论nature communication的

大哥，你问错地方了吧，这是互联网板块，你问北大生命科学院院长饶毅的信息干嘛？ 亏了我听过他的讲座。

。

。

中国科学与世界先进水平有多大差距？饶毅语出惊人：“就生命科学领域而言，相对水平低于美国1910年水准。

那年，摩尔根发表了对果蝇白眼突变分析的论文，一个学科——遗传学的重要部分在美国被奠定，我们迄今没有这样的成果，没有这样系统性的学科建树。

” 在中国的论文数量上，饶毅做了一回说破“皇帝新装”的人，指出国内出于“论文崇拜”、“国际期刊崇拜”，竟供养了大量“傍名刊”的国际骗子。

最近有英国《自然》杂志集团下的一家媒体提出一个“妙论”，说中国科学论文发表量是世界第二，相应地证明中国科技水平世界第二。

饶 毅表示：“实际上，英国杂志《自然》为了赚钱。

近几年出版了一本《Nature Communication》的杂志，这份杂志明确表示，凡是没有造假的 文章都可以发表。

还有前几年另一家国外出版社出版的《Plos One》，这些以版面费牟利的杂志，收到大量中国投稿，所以短时间内，大量来自中国的论文 发表在nature集团的杂志上，发表量急剧升高。

国内有些机构、部委竟将发表在这样刊物上的论文计算在有关统计中，nature这样宣传就是吸引你们来 发表。

” 饶毅其人 北京大学终身讲席教授、生命科学学院院长，兼北京生命科学研究所资深研究员。

回国前曾任美国西北大学 Elsa Swanson讲席教授、神经科学研究所副所长。

研究神经发育的分子机理和社会行为的生物学基础。

先后协助推动建立中国科学院神经科学研究 所、中国科学院上海交叉学科研究中心。

2004年起兼北京生命科学研究所学术副所长。

2007年9月全职回国。

中国科学院上海生命科学研究院怎么样？

简介：中国科学院上海生命科学研究院（Shanghai Institutes for Biological Sciences，缩写为SIBS）成立于1999年7月，是中国生命科学领域重要的综合性国立研究机构，由原上海地区的中国科学院8个生命科学研究所和2个研究中心的基础上组建而成。

根据中科院“创新2020”发展战略，中国科学院上海生命科学研究院科研任务为针对国家重大战略需求，聚焦生命现象本质、人口健康和农业发展的关键科学问题开展研究，探索有利于科学创新的体制与机制，建设成为综合、大型、跨领域、国际化、布局合理、具有强大竞争力和重要影响力的生命科学和健康科学研究和人才培养基地。

截至2014年底，中国科学院上海生命科学研究院共有在职职工2124人， 其中包括中国科学院院士21人、中国工程院院士2 人、中国科学院外籍院士1人、美国国家科学院院士2人、发展中国家科学院院士12人；有4个国家重点实验室，9个中科院重点实验室，1个中国科学院科学卓越创新中心，1个国家重大科技基础设施，1个上海市重点实验室；有1个一级学科博士点，11个二级学科博士养点；1个一级学科硕士点，1个二级学科硕士点；1个专业硕士点，并设有1个博士后流动站。