玉米赤霉烯酮酶免试剂盒[18min宽谱型]说明书地址:中国·无锡建筑西路599号ADD:No.
599JianzhuxiRoadWuxi,ChinaTEL:0510-851299094006871900FAX:0510-85129699玉米赤霉烯酮(ZEN)酶免检测试剂盒使用说明书【产品代码:MYT02600】试剂盒组成1.
1玉米赤霉烯酮(ZEN)包被反应板96孔1.
2ZEN标准溶液(0、1、3、9、27、81ppb)1套1.
3ZEN抗体溶液2瓶1.
4酶标二抗溶液2瓶1.
5显色液…2瓶1.
6终止液…1瓶1.
7浓缩洗涤液(10*2瓶1.
8样品稀释液…2瓶1.
9浓缩PBS溶液(10*1瓶1.
10酶标板框架1块仪器设备配置2.
1微量移液器,量程20~200L(建议尽可能选配8道或12道微量移液器)2.
2酶标仪(带450nm波长)2.
3小型粉碎机或均质机2.
4离心机、振荡器或超声仪2.
5恒温培养箱2.
6分析天平2.
7冰箱2.
8玻璃器皿:锥形瓶、烧杯、移液管、滤纸、漏斗等操作流程图适当稀释加样(90s)37℃,10min样品提取——————→试剂准备——————→免疫反应———————→37℃,8-10min目测、仪器法显色反应—结果判定—计算含量玉米赤霉烯酮酶免试剂盒[18min宽谱型]说明书地址:中国·无锡建筑西路599号ADD:No.
599JianzhuxiRoadWuxi,ChinaTEL:0510-851299094006871900FAX:0510-85129699实验准备4.
1样品处理:详见"样品处理方法".
4.
2洗涤液的配制:取适量【浓缩洗涤液(*10)】用蒸馏水稀释10倍待用.
例如:取5mL【浓缩洗涤液(*10)】,加45mL蒸馏水,混匀后制成实验用洗涤液,足够24孔实验使用.
4.
3温度恢复:取出试剂盒中的检测试剂、待测样液,放置在室温及避光环境30min以上,恢复至室温,降低由于试剂温差引起的实验偏差.
实验步骤5.
1试剂平衡:将试剂盒所有试剂取出,室温中放置30min以上,平衡至室温.
5.
2小孔编号:移取所需微孔放置反应板支架上,设置ZEN标准溶液对照孔和样品孔(定量测定时设置1-6号为标准对照孔,其余为样品孔;定性测定时设置1-2号为标准对照孔,其余为样品孔).
5.
3免疫反应:按系列步骤所示,依次加入配制好的溶液及待测样液.
第一步:1-6号孔分别加入50LZEN标准溶液(0、1、3、9、27、81ppb),其余孔加入相应的待测样液.
第二步:向各微孔中分别加入50LZEN抗体溶液及50L酶标二抗溶液.
第三步:轻轻振摇,使各孔中反应物混匀.
第四步:37℃,孵育10min.
5.
4洗涤:用力甩掉微孔中的反应液(甩3次),在吸水纸上拍干(拍3次).
每孔加入250L(约5滴)洗涤液,洗液不得溢出,轻轻敲击反应板框架10秒,用力甩掉洗液(甩3次),在吸水纸上拍干(拍3次).
按上述操作再重复洗涤4次,最后一次要保证微孔完全拍干.
5.
5显色:在每个微孔中加入100L显色液,混匀,放入37℃孵育箱中,显色8-10min.
反应物组成表操作步骤加入量孔号123456第一步50l01392781待测样液第二步50lZEN抗体溶液50l酶标二抗溶液第三步摇匀第四步37℃,孵育10min玉米赤霉烯酮酶免试剂盒[18min宽谱型]说明书地址:中国·无锡建筑西路599号ADD:No.
599JianzhuxiRoadWuxi,ChinaTEL:0510-851299094006871900FAX:0510-851296995.
6终止:在每个微孔中加入50L终止液,轻轻敲击微孔板,使反应物混匀.
5.
7读数:将反应板在5min内放入450nm酶标仪中读取吸光度值(OD值).
结果计算6.
1软件定量计算法推荐采用国际领先的专业数据处理软件进行结果计算.
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6.
2作图定量计算法将系列ZEN标准溶液(0,1,3,9,27,81ppb)测得的吸光度OD值,绘制成标准曲线(见示意图).
横坐标为标准溶液浓度的常用对数值(lgC),纵坐标为各标准孔OD值与0ppb标准孔OD值的比值(B(标准液)/B(0ppb)).
玉米赤霉烯酮(ZEN)标准曲线示意图(注:示意图仅供参考)计算待测样品孔OD值与OD(0ppb)的比值(B样品/B(0ppb)),查标准曲线,可得到相应待测样液浓度(C)的常用对数值lgC,对其求反对数,可求得待测样液的ZEN浓度C.
按下列公式计算出样品中ZEN的含量:ZEN含量(g/kg)=C*V*Dm式中:C:待测样液中ZEN含量(ppb或g/kg)V:样品提取液体积(mL)m:样品质量(g)D:样品提取液的再稀释倍数6.
3确证实验对于重要样品、疑似样品,建议采用试剂盒进行初步筛查检测,再用国家标准方进行确证.
玉米赤霉烯酮酶免试剂盒[18min宽谱型]说明书地址:中国·无锡建筑西路599号ADD:No.
599JianzhuxiRoadWuxi,ChinaTEL:0510-851299094006871900FAX:0510-85129699样品处理7.
1玉米(食品或饲料级)称取5.
0g样品(注:粉碎,过20目筛)于100mL具塞三角瓶中,准确加入25.
0mL70%甲醇水(7+3)溶液,振摇10min(约200rpm).
取适量样品的甲醇水提取液于离心管中,3500rpm以上,离心5min,取上清液中间层,即为样品提取液.
取0.
2mL玉米样品提取液,加1.
0mL【样品稀释液】,混匀即得玉米待测样液(稀释系数30).
将待测样液进行ELISA分析测定.
7.
2普通饲料称取5.
0g样品(注:粉碎,过20目筛)于100mL具塞三角瓶中,准确加入25.
0mL70%甲醇水(7+3)溶液,振摇10min(约200rpm).
取适量样品的甲醇水提取液于离心管中,3500rpm以上,离心5min,取上清液中间层,即为样品提取液.
取0.
2mL饲料样品提取液,加1.
0mL【样品稀释液】,混匀即得饲料待测样液(稀释系数30).
将待测样液进行ELISA分析测定.
7.
3玉米油(成品油或毛油)称取5.
0g样品于100mL具塞三角瓶中,准确加入25mL70%甲醇水(7+3)溶液,再加入20mL正己烷(或石油醚),振摇15min(约200rpm).
静止5min分层后,取适量下层样品甲醇水提取液于离心管中,3500rpm以上,离心5min,再取上清液中间层,即为样品提取液.
取0.
2mL玉米油样品提取液,加1.
0mL【样品稀释液】,混匀即得玉米油待测样液(稀释系数30).
将待测样液进行ELISA分析测定.
联系我们单位:百奥森(江苏)食品安全科技有限公司地址:无锡市建筑西路599号1幢税号:91320211550232092M百奥森公众服务号开户行:中国农业银行无锡蠡园支行帐号:10-655101040010864电话:0510-85129909,4006871900传真:0510-85129699网址:www.
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