武汉普诺赛生命科技有限公司
ibrs 时间:2021-01-06 阅读:()
ProcellLifeScience&TechnologyCo.
,Ltd.
使用前请仔细阅读说明书.
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:全国免费电话:400-650-3656销售电话:027-87287608销售邮箱:sales@procell.
com.
cnQQ客服:4006503656官方网站:www.
procell.
com.
cn[CL-0123]IBRS-2[IB-RS-2]〔猪肾细胞〕1.
OriginandGeneralCharacteristicsCellNameIBRS-2[IB-RS-2]SynonymsIB-RS2;IBRS-2;IBRS2;InstitutoBiologico-RimSuino-2OrganismSusscrofa,PigAge3monthsTissueMorphologyEpithelialGrowthPropertiesAdherentDescriptionsBiosafetyLevel2.
CultureConditionsandHandlingCompleteGrowthMediumDMEM(PM150210)+10%FBS(164210-500)+1%P/S(PB180120)SubculturingRemoveanddiscardculturemedium.
BrieflyrinsethecelllayerwithDPBSsolutiontoremovealltracesofserumthatcontainstrypsininhibitor.
Add1.
0to2.
0mLofTrypsin-EDTAsolutiontoflaskandobservecellsunderaninvertedmicroscopeuntilcelllayerisdispersed(usuallywithin2~3min).
Cellsthataredifficulttodetachmaybeplacedat37℃tofacilitatedispersal.
Add4.
0to6.
0mLofcompletegrowthmediumandaspiratecellsbygentlypipetting.
Addappropriatealiquotsofthecellsuspensiontonewculturevessels.
SplitTime2~3minSubcultivationRatio1:2-1:4DoublingTimeMediumRenewalevery2to3daysCryopreservationFreezeMedium:55%BasalMedium+40%FBS+5%DMSOStorageTemperature:LiquidNitrogenVaporPhaseCultureConditionsAtmosphere:Air,95%;CO2,5%;Temperature:37℃3.
SpecialFeaturesoftheCellLineTumorigenicReceptorExpressionAntigenExpressionApplicationsCellLineCollections武汉普诺赛生命科技有限公司——您身边的细胞专家Copyright2020-2021ProcellLifeScience&TechnologyCo.
,Ltd.
AllRightsReserved收到常温细胞后如何处理(细胞培养详细操作步骤请参照邮件《普诺赛细胞培养操作指南》)1.
首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象.
若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据).
2.
用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态.
因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态.
3.
仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等.
4.
静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态.
5.
贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5mL左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松.
6.
部分贴壁松散的细胞,运输时可能从瓶底脱落.
收到细胞时若发现细胞脱落,可在静置2-3h之后观察细胞情况,若脱落较多,且有成团的情况,可将细胞团和上清一起收集离心,用PBS清洗一次,加入0.
25%胰蛋白酶消化0.
5-1min,加完全培养基终止后重悬吹散,接种至新的培养瓶中,原瓶未脱落的细胞可补加培养基继续培养,但在细胞生长出现堆积的情况时应及时传代.
发表[中文论文]请标注:IBRS-2[IB-RS-2](ProcellCL-0123)由武汉普诺赛生命科技有限公司提供;发表[英文论文]请标注:IBRS-2[IB-RS-2](ProcellCL-0123)werekindlyprovidedbyProcellLifeScience&Technology
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CultureConditionsandHandlingCompleteGrowthMediumDMEM(PM150210)+10%FBS(164210-500)+1%P/S(PB180120)SubculturingRemoveanddiscardculturemedium.
BrieflyrinsethecelllayerwithDPBSsolutiontoremovealltracesofserumthatcontainstrypsininhibitor.
Add1.
0to2.
0mLofTrypsin-EDTAsolutiontoflaskandobservecellsunderaninvertedmicroscopeuntilcelllayerisdispersed(usuallywithin2~3min).
Cellsthataredifficulttodetachmaybeplacedat37℃tofacilitatedispersal.
Add4.
0to6.
0mLofcompletegrowthmediumandaspiratecellsbygentlypipetting.
Addappropriatealiquotsofthecellsuspensiontonewculturevessels.
SplitTime2~3minSubcultivationRatio1:2-1:4DoublingTimeMediumRenewalevery2to3daysCryopreservationFreezeMedium:55%BasalMedium+40%FBS+5%DMSOStorageTemperature:LiquidNitrogenVaporPhaseCultureConditionsAtmosphere:Air,95%;CO2,5%;Temperature:37℃3.
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首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象.
若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据).
2.
用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态.
因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态.
3.
仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等.
4.
静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态.
5.
贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5mL左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松.
6.
部分贴壁松散的细胞,运输时可能从瓶底脱落.
收到细胞时若发现细胞脱落,可在静置2-3h之后观察细胞情况,若脱落较多,且有成团的情况,可将细胞团和上清一起收集离心,用PBS清洗一次,加入0.
25%胰蛋白酶消化0.
5-1min,加完全培养基终止后重悬吹散,接种至新的培养瓶中,原瓶未脱落的细胞可补加培养基继续培养,但在细胞生长出现堆积的情况时应及时传代.
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