转录组数据分析转录组的结果与q-pcr验证结果怎么作图分析
转录组数据分析 时间:2021-09-20 阅读:(
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生物信息学的分析工作,基因组组装,转录组组装需要什么电脑软件
组学omics,研究的是整体.按照分析目标不同主要分为基因组学,转录组学,蛋白质组学,代谢组学.基因组学研究的主要是基因组DNA,使用方法目前以二代测序为主,将基因组拆成小片段后再用生物信息学算法进行迭代组装.当然这仅仅是第一步,随后还有繁琐的基因注释等数据分析工作.转录组学研究的是某个时间点的mRNA总和,可以用芯片,也可以用测序.芯片是用已知的基因探针,测序则有可能发现新的mRNA,蛋白组学针对的是全体蛋白,组要以2D-Gel和质谱为主,分-down和bottom-up分析方法.理念和基因组类似,将蛋白用特定的物料化学手段分解成小肽段,在通过质量反推蛋白序列,最后进行搜索,标识已知未知的蛋白序列.代谢组分析的代谢产物,是大分子和小分子的混合物,主要也是用液相和质谱.总而言之,这些技术都想从全局找变量,都是一-down的研究方法,原因很简单:避免‘只缘身在此山中’的尴尬.但因为技术局限,都各有缺点,尤其是转录组和蛋白组数据,基本上颠覆了以前一直认为的mRNA水平能代表蛋白水平的观念,因为这两组数据的重合度太低.所以目前很多研究都开始使用交叉验证方法.转录组测序的大致流程?我们要测某个菌在进行某一个反应期间的转录组,刚刚接触不太明白,希望大神解决一
以真核转录组测序为例,实验流程为总RNA提取-mRNA分离-建库试剂-定量-文库回收-桥式扩增-上机测序;项目分析流程为数据产出数据=数据去杂-转录组拼接-SSR分析及SNP分析-基因功能注释-基因表达差异分析-差异基因表达模式聚类-差异基因富集分析。
转录组分析的是转录水平还是转录后
转录组是指某个物种或特定细胞在某一生理功能状态下,细胞内所有转录的mRNA产物的集合,包含了时间和空间的限定,是连接基因组遗传信息与生物功能的蛋白质组的必然纽带。
转录水平的调控是目前研究最多的,也是生物体最重要的调控方式。
应用高通量技术进行转录组测序是一种快捷可靠的获取转录组信息的方法。
mRNA的转录本表达分析,通过获得研究对象基因组转录区域的信息,鉴定转录发生位点,可变剪切等,其精确的计数方法更可对基因进行精确的定量分析。
有谁可以详细讲述一下二代测序下机后数据分析流程和所用到的软件及程序?
不同的测序项目,数据分析流程及用到的软件有些差异,以转录组测序为例,项目分析流程为:数据产出统计-数据去杂-转录组拼接-SSR分析及SNP分析-基因功能注释-基因表达差异分析-差异基因表达模式聚类-差异基因富集分析。
用到的软件有SeqPrep、Sickle、Trinity、bowtie、RSEM、edgeR、BLAST、blast2go、blastx/blastp 2.2.24+、Samtools、VarScan v.2.2.7、
mander、goatools、KOBAS。
什么是转录组分析
转录组分析指对细胞内所有转录产物的集合的分析。
转录组(transcriptome)广义上指某一生理条件下,细胞内所有转录产物的集合,包括信使RNA、核糖体RNA、转运RNA及非编码RNA;狭义上指所有mRNA的集合。
转录组测序一般是对用多聚胸腺嘧啶(oligo-dT)进行亲和纯化的RNA聚合酶II转录生成的成熟mRNA和ncRNA进行高通量测序。
相对于传统的芯片杂交平台,转录组测序无需预先针对已知序列设计探针,即可对任意物种的整体转录活动进行检测,提供更精确的数字化信号,更高的检测通量以及更广泛的检测范围,是目前深入研究转录组复杂性的强大工具。
扩展资料:
转录组测序的技术路线:
样品要求:
1、样品纯度要求: total RNA?OD值应在1.8至2.2之间;电泳检测28S:18S至少大于1.5。
2、样品浓度: total RNA浓度不低于400ng/ul;样品总量不低于15ug;目前最新的样品建库要求降低到1ug,浓度大于50ng/ul即可。
3、提供total RNA样品具体浓度、体积、制备时间、溶剂名称及物种来源。
请同时附上QC数据,包括电泳胶图、分光光度或Nanodrop仪器检测数据。
如需进行多次样品制备,需要提供多次样品制备所需样品。
参考资料来源:搜狗百科——转录组转录组的结果与q-pcr验证结果怎么作图分析
区分你的模板里面是否有基因组污染的方法:在做逆转录反应的同时,做一个阴性对照,其他所有都和实验组相同,除了不加入逆转录酶。
得到RT-PCR产物后跑胶,如果该阴性对照里也扩增出来明显条带的话,你的模板就是有基因组污染,否则就是正常。
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