成虫开原龙卷风致6死

第l8卷3期2003年6月中国病毒学VIRoLoGICASDⅡGAl8(3):2340June20o3的卫黑胸知的的研现及黑胸大蠊浓核症病毒对雌成虫生殖的亚致死影响夏克祥,汤显春(中国科学院武汉病毒研究所,武汉,430071)SublethalEffectsofDensonucleosisvirusonReproductioninFemaleAdultsofPeriplanetafuliginosaXIAKe—xiang,TANGXian—chunfWuhanInstituteofVirology,ChineseAcademyofSciences,Wuhan430071,ChinaJAbstract:Sublethaleffectsofreproduotioninfemaleadultswerefoundwheneighthandninth.
instarfemaleP.
fuliginosanymphswerwtreatedbyPf1)NVwiththreedifflrentconcentrations.
Theresultsshowedthatthelongevityoffemaleadultswerereduced121days,145daysand179days,respectively.
Thecvipositionperiodwerereduced62days,56daysand121days,respectively.
Thenumberofoothecaeslaidwerereduced16oothecaes/female,20oothecaes/femaleand25oothecaes/female,respectively.
Thenumberofeggslaidwerereduced354eggs/female,453eggs/femaleand558维普资讯http://www.
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com中国病毒学第18卷(1979)报道了海灰翅夜蛾(Spodopteralitteralis)3龄和5龄幼虫感染NPV后,蛹重变轻,成虫畸形,每雌蛾产卵量减少,后代死亡数增加【4J.
Robe~L.
andCotySchai(1990)报道了用化学药剂处理德国蜚蠊若虫,其成虫寿命和一生的产卵力显著减少、无效卵鞘数增多等【5】.
至于黑胸大蠊浓核症病毒对该蜚蠊雌成虫是否会产生同样的结果,至今未见报道.
本试验的目的在于通过研究黑胸大蠊浓核症病毒对该蜚蠊雌成虫生殖的亚致死影响的程度、范围和时期,为用该病毒防治黑胸大蠊、干扰雌成虫的生殖行为、抑制其繁殖力、降低蜚蠊密度、制定防治策略等提供某些依据.
现将结果报道如下.
1材料与方法1.
1材料黑胸大蠊病毒虫尸是由本所杨明辉提供的病毒在实验室内感染致死的.
黑胸大蠊是在实验室条件下人工饲养的8-9龄雌性若虫.
饲料为BALB/C鼠料.
1.
2方法病毒悬浮液的制备:按虫尸(g):无菌水(mL)=0.
25:1、0.
125:1和0.
0625:1的比例,制备三种浓度的病毒悬浮液.
病毒的分离提纯按杨明辉等人的方法t6/进行.
将病毒虫尸用无菌水在研钵中研碎,用尼龙沙布过滤,滤液经3500r/min离心30min,取上清液,再经12000r/min离心30min,取上清液,即病毒悬浮液.
取病毒悬浮液样品在电子显微镜下观察,其中的病毒形态大小与杨明辉等人报道的相同【oJ.
感染饲料的制备:将鼠料研磨成粉状,灭菌,然后将病毒悬浮液按1:1比例(1g饲料:lmL悬浮液)加入饲料中,混匀后供感染用.
感染:将末龄若虫分别放于1lcm*8cm塑料缸,每缸10头,放lg感染饲料和无菌水,感染饲养12d后,换无病毒饲料饲养.
每种浓度处理50头.
感染温度26℃~28℃.
对照用无菌水加饲料混合.
存活的若虫羽化后,按1:1性比配对,分别放入6.
7cm*7.
1cm塑料杯中饲养.
每杯放1对,编号.
杯内放无病毒饲料、无菌水和消毒的折叠纸.
每天观察产卵情况,记载每对成虫产卵日期和数量.
将24h内产的卵鞘逐一取出、测量大小,称重,然后分别放入青霉素瓶(青霉素瓶经高温消毒).
每瓶放1个,标上产卵序号和日期.
每天观察卵鞘孵化情况,记载孵化日期、数量及每个卵鞘的含卵数.
数据按莫惠栋的方法进行数理统计】.
生殖力按参考文献【8】介绍的公式计算.
黑胸大蠊成虫置于LRH一250一G光照培养箱,28±1℃.
光周期L:D=8:16.
用1/10000电子天平称重.
2结果与分析2.
1不同浓度病毒对雌成虫生殖的影响三种浓度病毒对雌成虫生殖的影响的结果见表1.
表1三种浓度病毒对雌成虫生殖的影响TablelEffectsofdifferentconcentrationsofPfDNVonreprodutioninfemaleadultsofPeriplanetafuliginosa处~(Treatment)62.
5mg/mL125mg/mL250mg/mL对照(Contro1)羽化率(%)Ratesofadultemergencing(%)73.
370.
083.
393.
3产卵期(d)Periodofeggslaid(d)Il8.
74-43.
5124.
1q-41.
859.
84-50.
8180.
4~20.
9产卵前期(d)Periodbeforeegglaid(d)17.
2±1.
920.
74-7.
015.
1±3.
218.
7~1.
8产卵间隔时间(d)Intervaltimeofegglaid(d)6.
54-0.
57.
54-0.
87.
5~2.
45.
5~0.
2寿命(d)Longevity(d)97.
44-48.
072.
84-44.
638.
7~24.
9218.
1~27.
9产卵鞘数(个/雌)Nubmberofoothecaes/female12.
24-6.
57.
94-5.
93.
4-+-3.
128.
1~4.
0卵鞘重量(nag)Weightofoothecae127.
84-0.
8124.
34-3.
4129.
3±5.
9127A~0.
3卵鞘长度(cm)Lengthofoothecae1.
254-0.
151.
194-0.
031.
17~0.
041.
21~0.
17卵鞘含卵数(粒,鞘)Numberofeggsperoothecae23.
34-0.
723.
44-0.
823.
5~1.
322.
7~0.
3卵历期(d)Periodofeggs(d)53.
44-2.
246.
84-2.
146.
9~2.
646.
2~0.
5卵孵化率(%)Ratesofegghatching(%)91.
34-4.
893.
04-2.
592.
5+j.
688.
4±2.
1卵鞘孵化率(%)Ratesofoothecaehmching(%)34.
133.
842.
062.
2维普资讯http://www.
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com夏克祥,等.
黑胸大蠊浓核症病毒对雌成虫生殖的亚致死影响239雌若虫羽化率明显比对照低10%~23%.
雌成虫寿命平均分别缩短121d、145d和179d.
雌成虫产卵期分别平均缩短62d、56d和121d.
每雌成虫产卵鞘数显著减少,平均减少l6个/雌、20个/雌和25个/雌.
雌成虫的产卵间隔时间延长l~2d,而产卵前期有的短于对照2d~4d,有的长于对照2d.
雌成虫产的卵鞘在重量、长度、含卵数、卵历期和卵孵化方面与对照相比均无明显差异,而卵鞘孵化率分别低于对照28%、28%和20%,表明无效卵鞘数增多.
以上结果说明,三种浓度病毒对雌成虫的生殖有显著或明显的亚致死影响,其影响程度随浓度不同而异.
最直接的影响是雌成虫寿命缩短、产卵期减短、产卵间隔时间延长、每雌成虫产卵鞘数大幅度下降,导致生殖能力大大减弱.
其次,无效卵鞘增多,致使繁殖率下降.
2.
2低浓度病毒对不同年龄雌成虫生殖的影响据作者对黑胸大蠊生物学特性研究表明,雌成虫的平均寿命长达200d,平均产卵期为156d.
产卵鞘数集中在前4个月,每雌虫平均累计产卵鞘21个,占总产卵鞘数(30个)的70%【9.
1们.
病毒对雌成虫生殖的影响是持续整个产卵期还是产卵期的某一段.
从雌成虫年龄上分解观察病毒的影响是必要的.
从表2的结果表明,病毒对不同年龄雌成虫生殖的影响是不同的.
病毒对雌成虫产卵鞘量的影响从1月龄持续至4月龄,干扰或抑制雌成虫的产卵是相当明显的.
雌成虫的产卵间隔时间在l~2月龄时被延长约ld,在3~4月龄时几乎无影响.
无效卵鞘率随雌成虫年龄的增大而增大,在3~4月龄时最为明显,分别增加23%和26%.
在有效卵鞘中,l~4月龄时的卵孵化率与对照无多大差别,有的还高于对照,说明对不同时期的卵孵化率无影响.
卵历期在l一2月龄时与对照差别不大,而在3—4月龄时差别明显,分别延长14d和15d.
病毒对不同时期卵鞘的重量、长度和含卵数均没有影响.
综上所述,雌成虫产卵从1~4月龄持续受到病毒的影响,而卵鞘的长度、重量和含卵数在1~4月龄期间均未受影响.
无效卵鞘数和卵历期在3~4月龄受影响明显,而产卵间隔时间在l~2月龄期间受影响微弱.
表2PfDNV对不同年龄雌成虫生殖的影响Table2effectsoflowconcentrationPfDNVonreproductionindifferentagefemaleadultsofPeriplanetafulinosa注:病毒浓度为625mg/mLNote:TheconcentrationofPfDNVis62.
5m∥mL维普资讯http://www.
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com中国病毒学第l8卷3讨论病毒感染昆虫一般会产生二种结果:一种是致死,另一种是虽未死但体内携带病毒并影响其正常的生理功能,通称为亚致死.
本试验用亚致死浓度病毒处理黑胸大蠊,其雌成虫的生殖功能受到很大的影响.
这主要表现在雌成虫寿命、产卵期、产卵鞘数缩短或减少,产卵间隔时间延长和无效卵鞘的增多.
此外,病毒的作用时间长,对雌成虫生殖的影响可持续4个月,主要集中在雌成虫产卵盛期的前4个月,这些对用病毒防治黑胸大蠊均具有重要意义.
现在,防治害虫的指导思想通常是尽可能降低害虫种群数量,将危害程度控制在允许水平以下.
用病毒杀虫剂防治害虫,由于病毒喷撒的不均匀性和昆虫个体感染病毒量的差异性,可导致两种效果:即昆虫感染致死的前效果和感染亚致死的后效果.
本试验的结果表明,病毒对黑胸大蠊雌成虫的亚致死效果是非常明显的.
首先,黑胸大蠊的寿命平均缩短120~180d,产卵期缩短56~120d,说明雌成虫为害、繁殖的时间大为减少.
其次每雌成虫平均产卵鞘数分别减少16个、2O个和25个,说明雌成虫产卵能力极大减弱.
第三无效卵鞘率分别增加28%、28%和20%,说明卵鞘的活力大大降低.
此外,雌成虫在产卵盛期的前4个月的生殖力同样大大减弱(见表3).
病毒处理的每雌成虫每月平均产卵数比对照分别减少40%、47%、47%和5O%;生殖能力比对照分别下降40%、48%、47%和5O%.
表3病毒对不同年龄雌成虫生殖能力的影响Table3EffectsoflowconcentrationsofPfDNVonfertilityindifferentagefemaleadultsofPeriplanetafulinginosa以上的分析结果表明,病毒对黑胸大蠊雌成虫的亚致死效果直接作用是在雌成虫产卵盛期的前4个月极大地削弱了雌成虫的生殖能力,因而减少了后代繁殖量、降低了种群数量,最终达到控制危害程度的目的.
从本试验的结果中还可以得到一个启示,即在用病毒杀虫剂防治黑胸大蠊时第一次施撒病毒可在中龄若虫(5~6龄)盛期,第二次可在高龄若虫(8-9龄)盛期.
这样即可将前期中、低龄若虫致死又可干扰、抑制后期雌成虫的生殖行为.
此外,PIDNV三种浓度对雌成虫生殖均有明显的亚致死效果,其中浓度250mg/mL的效果更明显.
参考文献[11杨明辉,昧涛,刘勇,等.
黑胸大蠊病毒的发现[J]14(6):479.
简报[J】.
武汉粮食工业学院学报,1991,23(1):76.
[3]黄达远,胡远扬,张珈敏,等.
黑胸大蠊浓核症病毒的研究.
昆[4][6][7][8][9]自然杂志,1991,[1O][2]黄达远.
黑胸大蠊(Periplanetafuliginosa)非包涵体病毒的发现维普资讯http://www.
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