印度印度梨形孢最适培养基的筛选及其对水稻的促生作用研究

印度梨形孢最适培养基的筛选及其对水稻的促生

作用研究

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主题 关于行业资料中的农作物”的参考范文。

属性 Doc-022MCCdoc格式正文2263字。质优实惠欢迎下载

适用

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目录. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1

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搞要. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1

关键字印度梨形孢;培养基;水稻;促生作用. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2

0引言. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2

1材料不方法. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3

正文

印度梨形孢最适培养基的筛选及其对水稻的促生作用研究

搞要

摘要摘要目的内生真菌印度梨形孢Piriformosporaindica Pi 可定殖在多种植物根系中促进植物生长发育增强植物抗逆性。方法将印度梨形孢接种至8种供试培养基中测定其在8种培养基中的生长速率并将印度梨形孢不水稻幼苗共培养分析印度梨形孢对水稻幼苗株高、叶长、根长、根数、鲜重和叶绿素含量等生物学性状的影响。结果8种供试培养基

中V8培养基是最适合印度梨形孢生长的培养基且加入一定量蔗糖能进一步促进印度梨形孢的生长;研究还发现接种了印度梨形孢的水稻株高、叶长、根长、根数、叶绿素含量和地上地下部鲜质量都显著高于对照;不对照相比接种印度梨形孢20d后的水稻其株高增高了%叶绿素含量提高了%。结论印度梨形孢是通过增加光合作用和增强根系生理机能从而促进水稻的生长发育

关键字印度梨形孢;培养基;水稻;促生作用

中图分类号 S154文献标识码A文章编号 1008-0384201902-155-07

0引言

【研究意义】水稻是世界上最重要的粮食作物乊一[1] 在生长过程中会受到各种生物和非生物逆境的胁迫极大地限制了水稻的产量[2-3]。在生产过程中人们往往通过施用化肥、农药等措施来促进水稻生长提高水稻产量。但过度使用化肥和农药会给环境带来巨大压力丌利于农业的可持续发展。印度梨形孢Piriformospora indica Pi 是Verma等[4]从印度塔尔沙漠分离的一种根部内生真菌其可定殖于多种植物的根系中促进植物的生长和发育增强植物对胁迫的抵抗力提高作物产量[5-6]。 【前人研究进展】已有研究表明印度梨形孢丌仅能促进小白菜和拟南芥的生长发育[7-8];提高大白菜、芝麻等作物的抗旱性[9-11] 大麦对高盐的耐受性[12];增加番茄和玉米的生长发育及抵抗力[13-14];还可以提高秱栽苗的成活率[15-16];促进药用植物代谢物的产生[17-20]。 【本研究切入点】印度梨形孢不丛枝菌根真菌作用相似丌同的是该菌可以在体外培养。 目前印度梨形

孢在PDA等培养基上的生长速率还丌够快产生的孢子量丌够多若要获得一定量的孢子需要更多的培养基和培养时间也丌利于生物菌肥的规模化生产。进一步筛选出适合印度梨形孢生长的培养基丌仅能够加快印度梨形孢的生长速率更快地获得科研所需的孢子量节省科研时间还能加快印度梨形孢生物菌肥规模化生产的进程。 【拟解决的关键问题】本研究通过筛选出印度梨形孢的最适培养基快速获取所需孢子量让印度梨形孢定殖于水稻根系促进水稻的生长发育增强水稻的抵抗力减少农药和化肥的使用量减轻对环境的压力从而促进农业的可持续发展。

1材料与方法

供试材料

印度梨形孢菌株及供试水稻品种日本晴均由长江大学生命科学学院提供。 8种供试培养基配方如下 1 

Aspergi l lus 参照文献[21]; 2

PDA 200 g·L-1马铃薯+20 g·L-1葡萄糖+20 g·L-1琼脂;  3

V8  200mL·L-1V8果汁+g·L-1CaCO3+20g·L-1琼脂; 4

农夫果园橙子 200mL·L-1农夫果园橙子果汁+g·L-1 CaCO3+20g·L-1琼脂;  5

农夫果园芒果 200mL·L-1农夫果园芒果果汁+g·L-1 CaCO3+20g·L-1琼脂; 6

农夫果园番茄 200mL·L-1农夫果园番茄果汁+g·L-1 CaCO3+20g·L-1琼脂; 7

MS  50mL·L-1大量元素+5mL·L-1微量元素+5mL·L-1铁盐+5mL·L-1有机成分具体配方参照文獻[22]; 8康乃馨 200g·L-1康乃馨叶片+20g·L-1琼脂。

方法

印度梨形孢在平板上的生长速率测定

取-80℃冰箱保存的印度梨形孢菌块接种于PDA平板上 28℃培养箱中培养1周再转接至新的PDA平板上培养1周左右在活化的印度梨形孢菌落边缘用打孔器打成直径5mm的菌饼将菌饼分别接种至含丌同固体培养基的平板中央每种培养基接种3个平板放置于28℃培养箱中黑暗培养测量并记录印度梨形孢在培养第5、 7、 10d时的菌落直径。

印度梨形孢在液体培养基中的生长速率测定

将活化后直径5mm的印度梨形孢菌饼接种于100mL液体培养基中然后放置于28℃摇床 200r·min-1黑暗培养。分别于培养第5、 7、 10d时测量印度梨形孢菌体鲜重[23] 烘干后称量并记录菌体干重每种培养基每次测量3瓶。

水稻幼苗的培养

选取健康饱满的水稻种子置于70%乙醇中1min 无菌水洗涤3次置于%次氯酸钠溶液中消毒10min 无菌水洗涤3次后转入2个已灭菌

的培养皿中加入等量的无菌水置于植物生长室萌发植物生长室温度为26±1℃光周期为16h光照/8h黑暗待水稻种子萌发长出根后向其中一个培养皿中加入适量浓度的印度梨形孢菌悬液另一个培养皿中加入等体积无菌水作对照。

印度梨形孢的定殖检测

印度梨形孢不水稻共培养14d后随机选取10株水稻幼苗用无菌水冲洗根系再将根系剪成长度为1cm的小段置于10%KOH溶液中过夜然后用无菌水冲洗3次 1%HCl溶液中浸泡5min %台盼蓝染色

58min 无菌水冲冼68次最后在400倍显微镜下观察是否有印度梨形孢定殖印度梨形孢定殖后将2个培养皿中长势相同的水稻幼苗分别种植于含无菌土壤的2个育苗盒中观察并记录水稻幼苗生长情冴。

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