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WESTCHINAMEDICALJOURNAL2006,Vo1.
21,No.
1CN51—1356/R[文章编号]1002—0179(2006)01—0092—02·技术与方法·三联蛋白芯片法在胰岛自身抗体检测中的临床应用·ClinicalApplicationofCombinedProteinchipArrayinDetectionforIsletAutoanfibodies邓智勇,刘英,安振梅,李进前DENGZhi—yong,LIUYing,ANZhen—mei,eta1.
(i~1)lJ大学华西医院实验医学科激素检测宝,i~1)ll成都610041)(DivisionofHormoneTesting,DepartmentoflaboratoryMed&ine.
阢fChinaHospital,SichuanUniversity,Chengdu610041.
China)摘要:目的:评价三联蛋白芯片检测系统在胰岛自身抗体(GAD—A、ICA、IAA)检测中的临床应用价值.
方法:采用国内三联蛋白芯片法测定51例糖尿病病人胰岛自身抗体的结果与酶联免疫法(ELISA)测定的GAD—A,ICA,放免法(RIA)测定L结果进行比较.
结果:蛋白芯片法阳性检出率GAD—A23.
5%,ICA7.
8%,m27.
4%;酶联免疫法检测阳性GAD—A33.
3%,ICA41.
2%.
放免法I从19.
6%.
上述两组结果进行比较,两组相比ICA有统计差异(P0.
05)whileICAweresignificantlyhigherbyEⅡsA(PO.
05表3.
胰岛素抗体(IAA)两组结果比较比较无统计差异P>0.
05衰4.
51例血清GAD—A.
I(和IAA检测结果51例血清三联蛋白蛋白芯片法结果阳性率GAD一位3.
5%,ICA9.
8%,IAA27.
5%;51例血清酶联免疫法(GAD—AICA)放免法(L)结果阳性率:GAD—A33.
3%,ICA41.
2%,IAA19.
6%.
两组结果一致率比较GAD—A62%,ICA6_4.
7%,A64.
7%,IAA64.
7%.
三联蛋白芯片法检测胰岛自身抗体敏感性分别为GAD—A23.
5%,ICA19.
O%,IAA30.
O%;特异性分别为GAD—A79.
4%,ICA96.
7%,IAA73.
2%;阳性预测值分别为GAD一.
A41.
7%,ICA8O.
O%,L21.
4%;阴.
性预测值分别为GAD—A69.
2%,ICA64.
4%.
IAA81.
1%.
3讨论·I型糖尿病是一种针对胰岛8细胞的自身免疫性疾病.
患者体内常可检测出多种胰岛自身抗体存在,如GAD—A、ICA、IAA、IA—n等,而GAD—A、ICA、M对1型糖尿病有高度诊断敏感性和特异性….
多个自身抗体对1型糖尿病的检测能力较单一自身抗体强,即抗体数目而非抗体种类或滴度对糖尿病分型诊断有更高的价值【2J2.
检测自身抗体的方法有酶联免疫法,放免法等,存在检测较费时,报告周期较长,放射http://www.
paper.
edu.
cn中国科技论文在线华西医学2006;21(1)CN51—1356/R[文章编号]1002—0179(2006)01—0093—03反相高效液相色谱法测定血浆中埃索美拉唑浓度DeterminationofEsomeprazoleinHumanPlamlabyRIP—-HPLC余勤,梁茂植,赵焱①,秦永平,邹远高,南峰②,黄帮华②YUQin,LIANGMao—zhi,ZHAOYan.
etaI.
(四川大学华西医院临床药理研究室,四川成都610041)(DivisionofUinia~Pharmacology,WestChinaHospital,Sichtu~nUniversity,Chengdu610041,China)摘要:目的:建立反相高效液相色谱法测定人血浆中埃索美拉唑(esomeprazole,EMZ)浓度.
方法:血浆样品用二氯甲烷萃取后经YMCC18(150ramx4.
6mm,5tan)色谱柱(柱温:35%),用流动相甲醇一O.
02mol·L一醋酸铵(NH3'H2O调pH7.
6)=51:49,以流速lml·min洗脱分离,用卡马西平为内标,检测波长306rim.
结果:标准曲线线性范围3.
9—2000.
0ng·mlI1;萃取回收率70.
6%~76.
7%;加样回收率89.
1%104.
6%;日内测定RSD为4.
8%一6.
6%,日间测定RSD为2_8%一5.
6%.
结论:本方法快速、灵敏、准确、简便,适用于EMZ血药浓度测定及药代动力学研究.
关键词:埃索美拉唑;高效液相色谱法;药代动力学[中国分类号]tLO27.
2;R975[文献标识码]AAbstract:Objective:TheaimofthisstudywastodevelopaRP—HPLCmethodtodeterminetheconcentrationof~somepFa.
zole(EMZ)inhumanplasma.
Methods:TheplasnlasamplewasextractedwitI13mldichloromethane.
tI1enseparationwasachievedontheYMcCI8(150x4.
6mm-5tan)column.
11hemobilephaseconsistedofMeOH:0.
02mol/LNI~Ac(AdjustpH【hN·Oto7.
6)=51:49andtheeffluentwasmeasuredat306IIlTI.
Carbamazepinewasusedasanintemalstandard.
Resuits:eretentiontimesforesomeprazoleandCarbamazepineworel1.
6minand9.
6min.
ecalibrationcurveswerelinearintherangeof3.
9—2000.
0ng·ml~.
quantitationlimitofdetectioninplasmawas3.
9ng·ml:Ⅱ1eextractionrecoveryofesomeprazolewere70.
6—76.
7%;lhemethodologicalrecoverywere89.
1~104.
6%;within—dayRsDwere4.
826.
57%andinter—dayRSD2.
8~5.
6%.
Conclusion:11heassaywassimple-rapid.
andsensitive.
Itwassati幽edt0beusedtostudv山epharmacokineticsandrelativebioavailabilityofesomeprazoleinhumanplasma.
Keywords:esomeprazole;RP一删C;pharmaeokineties(Receiveddate:2O05—05一O9)埃索美拉唑(E~meprazole,简称EMZ,商品名:耐信)为世界上首次人工合成并用于临床的光学异构体质子泵抑制剂,它对胃食管反流性疾病患者的治疗和已愈合的腐蚀性食管炎的维持治疗均有显著疗效.
EMZ为奥美拉唑的s一异构体,光学性质稳定,其特点为口服后的首过效应较奥美拉唑和R一异构体少,生物利用度高,抑酸效果更好,药效较奥美拉唑更为持久.
在胃食管反流病患者中,EMZ比奥美拉唑、兰索拉唑和泮托拉唑等质子泵抑制剂控制胃内DH的效果更好.
为进行EMZ在中国人中的药代动力学及相关临床研究,本文建立了测定EMZ血浆浓度高效液相色作者简介:余勤(1969一),士,四J雅安人,主管技师*通讯作者①拳室研究生②实习生Arr兽-6…一氘C图1.
EMZ及内标血浆色谱图Fig1.
ChromatogramofEM_ZandI.
SinplasmaA.
Blankplasma,B.
StandardofEMZ&I.
Sinplasma.
C.
PI姗samplefrompafi~at1.
I_S2.
EM_Z谱测定法,尚未见到国内有相关报道.
1仪器和试药1.
1仪器和色谱条件岛津公司M一10Avp系列HPLC仪,SCL一10Avp系统控制器,SPD一10AVP紫外检测器:Lc一10ATvp注液泵,SIL一10Advp~自动污染等不足,应用三联蛋白芯片技术对三种自身抗体进行联合检测是目前糖尿病分型诊断和生物技术研究的良好结合点.
本报告使用国产三联蛋白芯片药盒对三种胰岛自身抗体进行联合检测所得结果与酶联免疫法(EIASA)检测GAD—A、ICA,放免法(RIA)检测姒进行两组比较分析,提高三联蛋白芯片法在胰岛自身抗体临床检测应用中的认识.
三联蛋白芯片法联合检测胰岛自身抗体,其方法的灵敏度有待提高.
4参考文献:I11VergeCF,StemgerD,BonifacioE,e1.
a1.
Combineduseofautoantibedies(1A一2tU.
1·toantibody,GADantibody,insulinaUtoanti—body.
cytoplasmicisletcellantibodies)i11type1diabetes:CombinatorialIsletAutoanti—bodyWorkshop[J].
Diabetes,1998,47:1857—1866.
12JYamamotoAM,Deschmn~I,GarchonHJ,e1.
a1.
YoungageandmAmark∞-hancetheriskofprogression1otype1diabetesinantibody—positivesiblingsofdiabtiechi{drenlJ].
JAutoimmun,1998,l1:643—65O.
[3]TKedadek.
Proteinmicroarrays:prospectsandproblems[J].
ChenBiol,2001,8:105—115.
(收稿日期:2005—06—08)
21,No.
1CN51—1356/R[文章编号]1002—0179(2006)01—0092—02·技术与方法·三联蛋白芯片法在胰岛自身抗体检测中的临床应用·ClinicalApplicationofCombinedProteinchipArrayinDetectionforIsletAutoanfibodies邓智勇,刘英,安振梅,李进前DENGZhi—yong,LIUYing,ANZhen—mei,eta1.
(i~1)lJ大学华西医院实验医学科激素检测宝,i~1)ll成都610041)(DivisionofHormoneTesting,DepartmentoflaboratoryMed&ine.
阢fChinaHospital,SichuanUniversity,Chengdu610041.
China)摘要:目的:评价三联蛋白芯片检测系统在胰岛自身抗体(GAD—A、ICA、IAA)检测中的临床应用价值.
方法:采用国内三联蛋白芯片法测定51例糖尿病病人胰岛自身抗体的结果与酶联免疫法(ELISA)测定的GAD—A,ICA,放免法(RIA)测定L结果进行比较.
结果:蛋白芯片法阳性检出率GAD—A23.
5%,ICA7.
8%,m27.
4%;酶联免疫法检测阳性GAD—A33.
3%,ICA41.
2%.
放免法I从19.
6%.
上述两组结果进行比较,两组相比ICA有统计差异(P0.
05)whileICAweresignificantlyhigherbyEⅡsA(PO.
05表3.
胰岛素抗体(IAA)两组结果比较比较无统计差异P>0.
05衰4.
51例血清GAD—A.
I(和IAA检测结果51例血清三联蛋白蛋白芯片法结果阳性率GAD一位3.
5%,ICA9.
8%,IAA27.
5%;51例血清酶联免疫法(GAD—AICA)放免法(L)结果阳性率:GAD—A33.
3%,ICA41.
2%,IAA19.
6%.
两组结果一致率比较GAD—A62%,ICA6_4.
7%,A64.
7%,IAA64.
7%.
三联蛋白芯片法检测胰岛自身抗体敏感性分别为GAD—A23.
5%,ICA19.
O%,IAA30.
O%;特异性分别为GAD—A79.
4%,ICA96.
7%,IAA73.
2%;阳性预测值分别为GAD一.
A41.
7%,ICA8O.
O%,L21.
4%;阴.
性预测值分别为GAD—A69.
2%,ICA64.
4%.
IAA81.
1%.
3讨论·I型糖尿病是一种针对胰岛8细胞的自身免疫性疾病.
患者体内常可检测出多种胰岛自身抗体存在,如GAD—A、ICA、IAA、IA—n等,而GAD—A、ICA、M对1型糖尿病有高度诊断敏感性和特异性….
多个自身抗体对1型糖尿病的检测能力较单一自身抗体强,即抗体数目而非抗体种类或滴度对糖尿病分型诊断有更高的价值【2J2.
检测自身抗体的方法有酶联免疫法,放免法等,存在检测较费时,报告周期较长,放射http://www.
paper.
edu.
cn中国科技论文在线华西医学2006;21(1)CN51—1356/R[文章编号]1002—0179(2006)01—0093—03反相高效液相色谱法测定血浆中埃索美拉唑浓度DeterminationofEsomeprazoleinHumanPlamlabyRIP—-HPLC余勤,梁茂植,赵焱①,秦永平,邹远高,南峰②,黄帮华②YUQin,LIANGMao—zhi,ZHAOYan.
etaI.
(四川大学华西医院临床药理研究室,四川成都610041)(DivisionofUinia~Pharmacology,WestChinaHospital,Sichtu~nUniversity,Chengdu610041,China)摘要:目的:建立反相高效液相色谱法测定人血浆中埃索美拉唑(esomeprazole,EMZ)浓度.
方法:血浆样品用二氯甲烷萃取后经YMCC18(150ramx4.
6mm,5tan)色谱柱(柱温:35%),用流动相甲醇一O.
02mol·L一醋酸铵(NH3'H2O调pH7.
6)=51:49,以流速lml·min洗脱分离,用卡马西平为内标,检测波长306rim.
结果:标准曲线线性范围3.
9—2000.
0ng·mlI1;萃取回收率70.
6%~76.
7%;加样回收率89.
1%104.
6%;日内测定RSD为4.
8%一6.
6%,日间测定RSD为2_8%一5.
6%.
结论:本方法快速、灵敏、准确、简便,适用于EMZ血药浓度测定及药代动力学研究.
关键词:埃索美拉唑;高效液相色谱法;药代动力学[中国分类号]tLO27.
2;R975[文献标识码]AAbstract:Objective:TheaimofthisstudywastodevelopaRP—HPLCmethodtodeterminetheconcentrationof~somepFa.
zole(EMZ)inhumanplasma.
Methods:TheplasnlasamplewasextractedwitI13mldichloromethane.
tI1enseparationwasachievedontheYMcCI8(150x4.
6mm-5tan)column.
11hemobilephaseconsistedofMeOH:0.
02mol/LNI~Ac(AdjustpH【hN·Oto7.
6)=51:49andtheeffluentwasmeasuredat306IIlTI.
Carbamazepinewasusedasanintemalstandard.
Resuits:eretentiontimesforesomeprazoleandCarbamazepineworel1.
6minand9.
6min.
ecalibrationcurveswerelinearintherangeof3.
9—2000.
0ng·ml~.
quantitationlimitofdetectioninplasmawas3.
9ng·ml:Ⅱ1eextractionrecoveryofesomeprazolewere70.
6—76.
7%;lhemethodologicalrecoverywere89.
1~104.
6%;within—dayRsDwere4.
826.
57%andinter—dayRSD2.
8~5.
6%.
Conclusion:11heassaywassimple-rapid.
andsensitive.
Itwassati幽edt0beusedtostudv山epharmacokineticsandrelativebioavailabilityofesomeprazoleinhumanplasma.
Keywords:esomeprazole;RP一删C;pharmaeokineties(Receiveddate:2O05—05一O9)埃索美拉唑(E~meprazole,简称EMZ,商品名:耐信)为世界上首次人工合成并用于临床的光学异构体质子泵抑制剂,它对胃食管反流性疾病患者的治疗和已愈合的腐蚀性食管炎的维持治疗均有显著疗效.
EMZ为奥美拉唑的s一异构体,光学性质稳定,其特点为口服后的首过效应较奥美拉唑和R一异构体少,生物利用度高,抑酸效果更好,药效较奥美拉唑更为持久.
在胃食管反流病患者中,EMZ比奥美拉唑、兰索拉唑和泮托拉唑等质子泵抑制剂控制胃内DH的效果更好.
为进行EMZ在中国人中的药代动力学及相关临床研究,本文建立了测定EMZ血浆浓度高效液相色作者简介:余勤(1969一),士,四J雅安人,主管技师*通讯作者①拳室研究生②实习生Arr兽-6…一氘C图1.
EMZ及内标血浆色谱图Fig1.
ChromatogramofEM_ZandI.
SinplasmaA.
Blankplasma,B.
StandardofEMZ&I.
Sinplasma.
C.
PI姗samplefrompafi~at1.
I_S2.
EM_Z谱测定法,尚未见到国内有相关报道.
1仪器和试药1.
1仪器和色谱条件岛津公司M一10Avp系列HPLC仪,SCL一10Avp系统控制器,SPD一10AVP紫外检测器:Lc一10ATvp注液泵,SIL一10Advp~自动污染等不足,应用三联蛋白芯片技术对三种自身抗体进行联合检测是目前糖尿病分型诊断和生物技术研究的良好结合点.
本报告使用国产三联蛋白芯片药盒对三种胰岛自身抗体进行联合检测所得结果与酶联免疫法(EIASA)检测GAD—A、ICA,放免法(RIA)检测姒进行两组比较分析,提高三联蛋白芯片法在胰岛自身抗体临床检测应用中的认识.
三联蛋白芯片法联合检测胰岛自身抗体,其方法的灵敏度有待提高.
4参考文献:I11VergeCF,StemgerD,BonifacioE,e1.
a1.
Combineduseofautoantibedies(1A一2tU.
1·toantibody,GADantibody,insulinaUtoanti—body.
cytoplasmicisletcellantibodies)i11type1diabetes:CombinatorialIsletAutoanti—bodyWorkshop[J].
Diabetes,1998,47:1857—1866.
12JYamamotoAM,Deschmn~I,GarchonHJ,e1.
a1.
YoungageandmAmark∞-hancetheriskofprogression1otype1diabetesinantibody—positivesiblingsofdiabtiechi{drenlJ].
JAutoimmun,1998,l1:643—65O.
[3]TKedadek.
Proteinmicroarrays:prospectsandproblems[J].
ChenBiol,2001,8:105—115.
(收稿日期:2005—06—08)
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