胭脂虫红色素是以醌类色素胭脂红酸为主要成分的红色染料,从胭脂虫(原产于中南美洲的昆虫)中提炼而得.被收录于食品卫生法

规定的现有添加物明细表中(*1),目前广泛应用于食品、药品、医药部外品、化妆品等众多领域.
卫生试验法中规定胭脂虫红色素的试验方法为TLC法,但是作为参考方法,也介绍了使用HPLC的测定例(*2).
此次,根据这一测定条件,使用HPLC-DAD对食品中的胭脂红酸进行了测定,在胭脂红酸的定性方面,除了峰的保留时间外,还根据DAD吸收光谱进行了确认.
(*1)现有添加物名簿收录品种明细表、厚生省生活卫生局通知卫化第56号(1996年5月23日)(*2)卫生试验法·注解2010(日本药学会编)食品中胭脂虫红色素(胭脂红酸)的测定例AS/LC-019Page.
1胭脂红酸标准样品测定例色谱柱:HITACHILaChromC18(5μm)4.
6mmI.
D.
*150mm流动相:0.
1mol/L柠檬酸缓冲液(pH3.
6)/甲醇=75/25流速:1.
0mL/min柱温:40℃检测波长:DAD220~700nm(280nm、495nm)(*)进样量:20μL重现性(10mg/L、n=6)线性在胭脂红酸标准样品的测定中,线性和重现性均得到了良好的结果.
保留时间(%RSD)面积值(%RSD)280nm0.
050.
19495nm0.
13【标准样品测定例(10mg/L)】r2=1.
0000(280nm)(0.
1~10mg/L)【胭脂红酸结构式】C22H20O13=492.
39Carminicacid【胭脂红酸的光谱图】(*)卫生试验法中列出的是在495nm下的测定例.
r2=0.
9999(495nm)(0.
5~10mg/L)20151050mAUCarminicacid280nm02461081214700500300nmminCarminicacid151050mAUCarminicacid20495nm051015200246810浓度(mg/L)面积(*104)02460246810面积(*104)浓度(mg/L)mAUnm30050070005101520Page.
2注意:本资料所示数据仅为测定例用数据而非可保证仪器性能的数据.
(2012/12)AS/LC-019通过使用DAD可以对标准样品和食品样品中检出的峰进行吸收光谱的比较,结果果冻中光谱一致,而清凉饮料中光谱形状则不同.
由此可以认为,在清凉饮料中检出的峰除胭脂红酸外,还混合了其他成分.
进一步尝试使用纯度检测功能检测了这个峰的纯度,结果发现其纯度很低.
综上认为,通过使用DAD可以增强定性能力.
主要仪器配置:Chromaster5110泵、5210自动进样器、5310柱温箱、5430DAD【检出的峰和胭脂红酸标准样品的光谱图】【检出的峰和胭脂红酸标准样品的光谱图】【清凉饮料的测定例】食品中胭脂红酸的测定例【果冻的测定例】食品中胭脂虫红色素(胭脂红酸)的测定例1240mAU8Carminicacid280nm1240mAU8Carminicacid02461081214700500300nmminCarminicacid495nm1240mAU8Carminicacid+(*)1240mAU8Carminicacid700500300nm02461081214minCarminicacid+(*)280nm495nm果冻胭脂红酸300500700nm300500700nm清凉饮料胭脂红酸(*)杂质果冻约5g←0.
1mol/LHCl、10mL超声提取30min离心分离3000rpm、10min上清稀释10倍(0.
1mol/LHCl)过滤(0.
45μm过滤器)分析样品(20μL)清凉饮料(含油性成分)1mL←5%高氯酸1mL离心分离10000rpm、10min上清1mL←己烷1mL振摇1min离心分离10000rpm、10min取下层(水层)用0.
1mol/LHCl稀释10倍过滤(0.
45μm过滤器)分析样品(20μL)