软件运行前的连接酶标仪插上电源,和电脑连接好后,打开电脑和酶标仪开关,酶标仪至少稳定15min后开始读数,效果比较好.
注意,当酶标仪处于poweron的状态时,不要手动打开酶标板室和比色皿室的门,以免紫外辐射的伤害或者仪器的损伤.
二.
软件的运行1.
打开桌面快捷方式SkanItREforMSS2.
4.
2运行软件,出现LogonToSkanItsoftware的界面.
2.
usename默认为"admin",password为空3.
点OK进入SkanItsoftware2.
4.
2界面,Newsession-新建任务程序,Opensession-打开已有程序.
4.
在界面上方的setting中选择Instrument,出现Instrumentsetting的界面,在Instrument中选中MultiskanspectrumonCOMⅠ,ThemoElectron.
点击右侧的setup,在serialnumber中输入1500-850,然后点击OK.
再点击Defaultinstrument右边的connect,即可设定好连接.
然后点击close关闭窗口.
三.
Newsession操作1.
新建任务程序:→点击newsession进入protocoloptions界面,在sessionname中输入新的程序名称→点击next进入platelayoutoptions界面,在selectplatetemplate中选择所需模板类型(一般96孔板选择usedefault,比色皿选择cuvette,其他的可以选择相应的类型)→输入platelayoutname(系统默认的与sessionname相同)→点击next进入Definitiondone界面,在selectlocation中选择任务程序所要保存的目的文件夹(该界面可进行新建,重命名及删除文件夹操作)→点击finish完成新建,进入SkanItsoftware2.
4.
2程序操作主界面(主要有三大块:platelayout用于模板区域选择,protocol用于程序编辑,results用于数据处理).
2.
platelayout对模板区域进行选取→点击wizard进入选取模板区域操作界面fillwizard(任务类型type有:blank空白,calibrator标准蛋白,control对照,empty空白,unkown一般为样品)→在右边模板中选取开始点位置,即红圆点所在位置.
→选取方向,在Fillingorder中可通过箭头设定.
→对于blank,在No.
ofreplicates中填写好重复数,选择好开始位点和方向,点击Add可完成.
→对于calibrator,在No.
ofcalibrators中填写标准蛋白的个数,在No.
ofreplicates中填写好重复数,选择好开始位点和方向.
如有浓度梯度,可选择Generateseries进行设置.
例如,取7个浓度蛋白做标准曲线,稀释倍数分别为20,40,80,160,320,640,1320,每个浓度重复两次,则在No.
ofcalibrators中填写7,在No.
ofreplicates中填写2,选择好选择好开始位点和方向.
然后选中Generateseries,出现conventions的界面,在Initialvalue中填写20,在operators中选择Multiply,stepby中填写2,点击ok.
→对于control,操作基本和calibrators相似.
→对于Empty操作基本和blank相似.
→对于unknown,填写好No.
ofreplicates,No.
ofunknowns并选择好开始位点和方向,点击Add即可完成.
→第一块板填满后,有时会自动进入第二块板的编辑,注意看Fillwizard的模板下方的currentplate,如果显示为2/2,则可以直接关掉窗口,模板区域即可编好.
标注:对于单一型任务可先选取全模板【即在No.
ofunkown选项中设为模板最大孔数】,然后对不要的区域进行删除.
对于非blank和empty型任务,若有浓度差,可勾选generateseries,然后进行设定:series为有规则的浓度差,multiplevalues为不规则的浓度差.
有规则的可通过运算公式,系统直接算出,无规则的通过键盘输入,点击add进行添加.
3.
编辑程序→选好所用模板区域后,点击protocol进入程序编辑界面.
→在protocolproperties所属框内的executionorder选项中选中数据读取路径(共有四种,第一种一般为常用路径,一次读四个孔).
→在Settledelay选项中设定读数时间间隔.
一般比色皿不需要读书时间间隔,设置为零即可,对于测量板而言,由于板在移动过程中液体表面共振波的影响,需要稳定一段时间,一般设置为5sina6-wellplate,300msina96-wellplate,<20msina384-wellplate.
→在steps所属框内空白处或选中程序单击鼠标右键得到应用程序子菜单.
→在子菜单中选取你所要运行的程序(如常用的程序有photometric,photometric-scanning,Incubate和shake等),并在该程序的选项中设定你所需的参数.
一般测蛋白含量选择photometric,在wavelength中设置好波长即可.
→所有程序编写好后,在session中点击save保存好模板程序,不保存将无法运行上面所设的模板程序.
4.
测读数据→在Execution所属框内点击connect链接机器,链接过程中会出现机器状态列表窗口,无异常后点Close关闭.
→在Execution所属框内点击runplateout弹出酶标板载板,把酶标板底部擦干后放上去后,确保平稳后点击runplatein,等酶标板进去.
→在Execution所属框内点击Executesession按钮运行所设程序,弹出Runname窗口,点击Ok确认运行.
接着会出现读数窗口,不要关闭读数窗口,读数完毕后窗口会自动消失,并弹出酶标板载板.
注:以前,无法进行人工读板,这是因为机器序列号的设置不对,要仔细查看机器上的机器序列号,将正确的序列号填入操作软件中的设置中.
5.
数据分析及保存→仪器读数完毕后,系统自动进入Results操作界面,在Result界面所属框中,可对所得数据进行分析.
→在Result所属框中,单击要分析数据的程序,如测蛋白一般选择的photometric,点鼠标右键得到数据分析方法主菜单.
→选择要分析的方法,测蛋白选择QuantitativeCurveFit,出现Parameters,Graph,Table,List可以点击查看结果.
→如果需要标准曲线,则在Graph的曲线图中单击右键选择Toolbar,图标上方会出现一系列图标,点击Copytoclipboard选择AsaBitmap,将其粘贴在新建word文档中并保存.
→点击Result左侧图标框中选择Export,在Parameters中的selectitemstoreport中选择要保存的内容,一般选择layout,Photometric,QuantitativeCurveFit,然后点击Add,在;右边的Reportitems中出现所选择的内容.
→在Afterexecution中选中Savetofile,通过右下方的Browse选择要保存的文件.
注意此次操作可能没有保存到目的文件夹.
必须进行以下步骤.
→点击上方的Report可看见结果,点击Save选择所要保存到的目的文件夹.
并检查是否所有要保存的数据都已经保存到相应文件夹中.
三.
Opensession操作若要运行或查看已有的程序,在登录界面点击Opensession,打开程序所在文件夹,单击所要运行或查看的程序(提示:在该界面中,点NewFolder可新建文件夹,Rename可对已有文件夹重命名,delete可对程序及文件夹进行删除),点Open打开.
然后可进行所需操作.
四.
仪器的断开与关闭在读数完成后若要关闭仪器,应先在Execution所属框内点击Runplatein,待酶标板载板进去后,点击disconnect断开仪器,然后再关闭仪器开关,盖好外罩.
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