DNS法对食用菌发酵液淀粉酶活力的测定
摘要选取广泛栽培的著名食用菌香菇、平菇和姬菇菌丝体为研究菌种采用3 5-二硝基水杨酸DNS比色法检测供试食用菌的淀粉酶产生能力。以2%可溶性淀粉为唯一碳源的查氏液体培养基诱导发酵供试食用菌产生的淀粉酶活力在1.513~3.417U/mL为食用菌工业发酵菌种的选育提供了参考依据和分析方法。
AbstractEnzyme energy o f amylase from edib le fungi was determinated b ased on
3 5-dinitryl-salicyle DNS .Taking czapek as induction medtum in whith the onlycarbon source was 2%soluble starch and amylase energy ranged from 1.513 to 3.417U/mL among Lentinula edodes Pleurotus ostreatusPleurotus cornucopiae so as toput forward a reference and analysis method for the edible fungistrain selection.
Key wordsedib le fungi fermention DNS amylase activity determination
经过人工驯化培养的食用真菌的菌丝体可以栽培扭结成食药用价值很高的子实体。近年来人们发现食用真菌菌丝体也可以仿效青霉菌发酵大规模生产食用菌多糖、抗生素、 酶制剂等亟待研发的生物活性物质[1]。食用菌发酵有赖于适宜的工艺条件与生物反应器但更取决于具工业开发价值的生产菌种的生理性状其中包括食用菌生产菌种对环境的适应性归结为食用菌的代谢能力能够利用廉价原料迅速生长并大量合成目的产物。许多工业发酵菌种不能直接利用淀粉生物工厂必须对原材料进行预处理通过液化、糖化生产微生物可以直接利用的淀粉水解糖。如果选育出具有淀粉酶活力的生产菌种就可以实现边糖化边发酵可极大地提高生产效率。因此探讨灵敏而准确的食用菌淀粉酶活力的测定技术具有重要的生理学意义和实践应用潜力。
淀粉酶活性测定方法较多[2]但大致分为4类一是测定底物淀粉的消耗量有粘度法、浊度法和碘—淀粉比色法等二是生糖法测定产物葡萄糖的生成量三是色原底物分解法 四是酶偶联法。利用3 5-二硝基水杨酸DNS比色法测定还原糖含量来反映淀粉酶活力是目前较常采用的方法。此法是用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。该方法测试所用试剂易得溶液有效期长且测试精确度高结果比较可靠。故笔者采用此法来测定供试食用菌产生淀粉酶的活力[3-5]。
1材料与方法
1.1供试材料
香菇Lentinula edodes 、平菇Pleurotus ostreatus和姬菇Pleurotus
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