亚麻上传软件

1183应用COⅠ短序列片段鉴定常见嗜尸性麻蝇汤振楚1,郭亚东2,蔡继峰2,李菁2(中南大学1.
湘雅医学院八年制2009级;2.
基础医学院法医学系,长沙410013)[摘要]目的:利用线粒体DNA(mtDNA)中278bp的细胞色素氧化酶辅酶Ⅰ(cytochromeoxidaseⅠ,COⅠ)序列鉴定我国常见嗜尸性麻蝇,寻求快速、准确的嗜尸性麻蝇种类鉴定方法.
方法:从12个省16个地区户外草地家兔尸体上采集麻蝇科3属4种共计19个样本.
利用十二烷基硫酸钠-蛋白酶K法提取蝇类胸肌mtDNA;Eppendorf5331型扩增仪对278bp的COⅠ基因片段进行PCR扩增;检测扩增产物,PCR胶回收纯化,测序并上传GenBank;利用MEGA4.
0软件按邻近法构建无根系统发育树,通过序列分析建立种内及种间进化分歧表.
结果:邻近法构建的发育树中4种麻蝇各自聚群,与形态学鉴定结果一致,上述麻蝇按照不同属、种分别聚类,其种内分歧整体均数均小于或等于3%,种间进化分歧均数在8%~12%之间.
结论:COⅠ中278bp基因序列能有效地鉴定常见嗜尸性麻蝇种类,进一步完善我国嗜尸性麻蝇基因库,为今后在实际案例中应用分子标记鉴定嗜尸性麻蝇进而推断死亡时间奠定基础.
[关键词]法医昆虫学;嗜尸性麻蝇;分子鉴定;细胞色素氧化酶辅酶ⅠDOI:10.
3969/j.
issn.
1672-7347.
2012.
11.
018IdentificationofcommonSarcophagidaebyshortcytochromeoxidaseⅠfragmentTANGZhenchu1,GUOYadong2,CAIJifeng2,LIJing2(1.
Grade2009,Eight-yearSystem,XiangyaSchoolofMedicine;2.
DepartmentofForensicMedicine,SchoolofBasicMedicalScience,CentralSouthUniversity,Changsha410013,China)ABSTRACTObjective:ToidentifythecommonSarcophagidaewitha278bpfragmentofcytochromeoxidaseⅠinmitochondrialDNAandtoobtainanunambiguousandrapididentificationmethodforSarcophagidaeinforensicinvestigations.
Methods:NineteenSarcosaprophagousflieswerecollectedfrom16locationsin12Chineseprovinces.
Allspecimenswerecomprisedof4species.
ThemtDNAofflieswasextractedwithSDS-PKextractionmethod.
PolymerasechainreactionwasconductedinanEppendorf5331thermalcycler.
ThePCRproductswerepurifiedandsequencedandtheobtainedsequenceswereuploadedtoGenBank.
Aneighbor-joiningtreewasconstructedwithMEGA4.
0package.
收稿日期(Dateofreception):2012–03–29作者简介(Biography):汤振楚,主要从事临床医学及法医昆虫学方面的研究.
通信作者(Correspondingauthor):李菁,Email:Lijing.
9065@163.
com基金项目(Foundationitems):湖南省自然科学基金(11JJ5075),上海市法医学重点实验室(司法部司法鉴定科学技术研究所)开放基金资助课题(KF1203),2010年大学生创新性实验计划(LC10108)及2012年国家大学生创新训练计划(201210533041).
ThisworkwassupportedbyNaturalScienceFoundationofHunanProvince,(11JJ5075),OpenProjectofShanghaiKeyLaboratoryofForensicMedicine(InstituteofForensicScience,MinistryofJustice,P.
R.